11:00
|
Michaela
Křivská
|
B3
|
prof. Dr. RNDr. Oldřich Lapčík
|
Imunoanalytické metody pro stanovení cykloartanových glykosidů
|
detail
Imunoanalytické metody pro stanovení cykloartanových glykosidů
Sutherlandia frutescens (L.) R.Br. (Fabaceae) je jednou z nejdůležitějších rostlin jihoafrické tradiční medicíny. Tato víceúčelová léčivka zaujala zejména antiproliferačními, anti-HIV a antidiabetickými vlastnostmi. Významný podíl na jejích biologických aktivitách se předpokládá u cykloartanových glykosidů – sutherlandiosidů.
Naše laboratoř se zaměřila na vývoj imunoanalytických metod pro stanovení sutherlandiosidů. Byly získány králičí polyklonální protilátky a sestavena ELISA metoda, která se využívá v klinické praxi pro ověření compliance užívání preparátů na bázi S. frutescens. Dalším cílem je vývoj sorbentu pro imunoafinitiní chromatografii pro přečištění extraktů ze složitých biologických matric před HPLC-MS.
Z antiséra (PL 104) byla získána imunoglobulinová frakce a imobilizována na komerčně dostupný nosič Affi-Gel® 10 (BioRad). Získaný imunosorbent by mohl být schopen vázat sutherlandiosidy včetně některých analog například z extraktů rostlin a rovněž jejich metabolity z moči probandů či pacientů při farmakokinetických studiích.
|
11:00
|
Bc.
David
Mervart
|
M2
|
Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Studium farmakokinetiky syntetických kanabinoidů metodou HPLC-MS
|
detail
Studium farmakokinetiky syntetických kanabinoidů metodou HPLC-MS
Navzdory tomu, že konopí bylo užíváno pro různé účely přes 4 tisíciletí, byl vývoj potencionálních léčiv založený na kanabinoidech velmi pomalý. Teprve nedávno začaly být kanabinoidy, především kanabidiol (CBD), objektem zájmu medicínských studií. V současné době probíhají studie, které mají potvrdit účinnost CBD u pacientů s epilepsií. Dále se objevují studie, které poukazují na skutečnost, že CBD by mohl být novým potencionálním kandidátem na léčbu Alzheimerovy choroby nebo užitečným terapeutickým prostředkem pro léčbu neuropatické bolesti provázející steatartritidu. U syntetických halogenovaných derivátů CBD je vyvozován předpoklad, že by mohly být potentnější než kanabidiol a účinněji přestupovat přes hemoencefalitickou bariéru.
Ve spolupráci s Národním ústavem duševního zdraví byly získány vzorky séra, moči a mozku laboratorních potkanů, kterým byla aplikována dávka bromovaného CBD gastrickou sondou, a dále vzorky séra, mozku, plic a jater potkanů, kterým byl obdobně aplikován chlorovaný CBD. Cílem práce je vyvinout metodiku zpracování vzorků séra a zmíněných tkání odebíraných v různém časovém intervalu po aplikaci látky a dále vyvinout metodu HPLC-MS pro kvantitativní stanovení hladin těchto látek. Výstupem práce pak bude farmakokinetický profil látek v animálním modelu.
|
11:00
|
Lucie
Svobodová
|
B3
|
Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Identifikace nových psychoaktivních látek Ramanovou a infračervenou spektroskopií
|
detail
Identifikace nových psychoaktivních látek Ramanovou a infračervenou spektroskopií
Nové psychoaktivní látky (NPS, New Psychoactive Substances) jsou látky, které vykazují omamný nebo psychotropní efekt a nejsou regulovány. Tato práce se zaměřuje na možnosti identifikace a popisu struktury jedné ze skupin NPS a to na syntetické deriváty kathinonu, látky přirozeně se vyskytující v rostlině Katha jedlá (Catha edulis). Pro účely analýz byl v rámci práce syntetizován pentylon (1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(methylamino)pentan-1-on), jakožto zástupce substituovaných derivátů kathinonu. Analýzy pentylonu a dalších strukturně podobných látek byly prováděny pomocí přenosného Ramanova a infračerveného spektrometru. Výstupem práce je vytvoření knihovny infračervených a Ramanových spekter těchto látek a porovnání vlivu jejich struktury na změřená spektra. V neposlední řadě byla porovnána schopnost použitých přístrojů kvalitně identifikovat strukturu těchto typů látek.
|
11:00
|
Tereza
Maříková
|
B3
|
Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Vývoj metody preparativní enantioseparace syntetických katinonů
|
detail
Vývoj metody preparativní enantioseparace syntetických katinonů
Nové psychoaktivní látky (new psychoactive substances – NPS) jsou rostlinné nebo syntetické substance, které se vyznačují nejčastěji stimulačním či halucinogenním účinkem. Tyto sloučeniny jsou zpravidla odvozeny od již zakázaných látek. Jednou z nejrozšířenější a v několika zemích EU dokonce nejužívanější skupinou NPS jsou syntetické deriváty kathinonu. Jeden z enantiomerů kathinonu, (S)-kathinon, je alkaloid přirozeně se vyskytující v mladých listech Katy jedlé (Catha edulis). Jeho syntetické analogy využívají podobnosti struktury a efektu s amfetaminem, avšak jsou zpravidla vyráběny v racemické formě. Vzhledem k tomu, že enantiomery mohou mít na živý organismus výrazně odlišné účinky, a to i účinky vedlejší, je důležité otestovat jednotlivé enantiomery in vivo. Cílem práce bylo nalezení účinné metody chirální separace tří derivátů kathinonu, a to methylonu, butylonu a pentylonu, které se samostatně nebo ve směsích běžně vyskytují na evropské drogové scéně. Po optimalizaci podmínek enantioseparace zvolených drog v analytickém módu na polysacharidové chirální koloně, byla metoda převedena do preparativního módu. Za optimalizovaných podmínek preparativní enantioseparace byly získány enantiomery všech cílových látek, které budou dále studovány na spolupracujících pracovištích.
|
11:00
|
Šárka
Janušová
|
M2
|
Doc. Dr. Ing. Ivan Raich
|
Studium GITR-signálního komplexu pomocí hmotnostní spektrometrie
|
detail
Studium GITR-signálního komplexu pomocí hmotnostní spektrometrie
T lymfocyty jsou významnou skupinou buněk imunitního systému. Na svém povrchu obsahují antigenně-specifický T buněčný receptor (TCR), díky kterému jsou schopné rozpoznat antigenní peptidy navázané na hlavním histokompatibilním komplexu (MHC). Po této specifické interakci TCR-MHC/peptid zahajují imunitní odpověď organismu. Pro jejich plnou aktivitu, a tak i účinnost, je potřeba současná signalizace ko-stimulačních molekul, které především prodlužují životnost a efektivitu T efektorových buněk.
Tato práce se věnuje kostimulační molekule z rodiny TNF – GITR/GITRL (glucocorticoid-induce TNFR-related protein). Ligand (GITRL) je glykoprotein typu II s trimerní strukturou. Navázáním na receptor (GITR), který je transmembránovým proteinem typu I, způsobí jeho trimerizaci a spustí navazující signalizaci.
Cílem této práce je analýza molekulárního mechanismu, jakým signalizuje ko-stimulační molekula GITR, pomocí hmotnostní spektrometrie a identifikace nových proteinů, které regulují jeho signalizaci.
|
11:00
|
Bc.
Klára
Gotvaldová
|
M2
|
Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Analýza psychoaktivních látek v houbách rodu Psilocybe metodou HPLC-MS
|
detail
Analýza psychoaktivních látek v houbách rodu Psilocybe metodou HPLC-MS
Psilocybe (lysohlávka) je nejpočetnějším rodem halucinogenních hub rostoucích nejen v České republice. Za psychoaktivní účinky hub jsou zodpovědné v nich obsažené alkaloidy - psilocybin, psilocin, baeocystin a norbaeocystin. Biologicky účinné tryptaminy jsou obsaženy v plodnicích (nadzemních částech hub), ale i v jejich myceliích (podhoubích). V současnosti se syntetický psilocybin používá jako modelová látka indukované psychózy pro potenciální léčbu depresí, úzkostí a obsedantně kompulzivních poruch.
Cílem této práce bylo stanovit čtyři uvedené serotonergní tryptaminy v sušených a lyofilizovaných matricích hub pomocí metody UHPLC-MS/MS. Byla sledována závislost obsahu zkoumaných alkaloidů na velikosti plodnic hub a dále také, zda jsou tyto alkaloidy obsaženy i ve třeních (nohách) hub. Celkem bylo analyzováno 21 vzorků hub z deseti různých druhů rodu Psilocybe.
Z výsledků je patrné, že menší plodnice obsahují vyšší množství psychotropních tryptaminů a třeně hub obsahují zhruba polovinu účinných látek než jejich klobouky.
|
11:00
|
Bc.
Pavla
Průchová
|
M2
|
Kuchař Martin Ing. Ph.D.
|
Analýza endogenních steroidů v lidském séru metodou HPLC-MS
|
detail
Analýza endogenních steroidů v lidském séru metodou HPLC-MS
Endogenní steroidy jsou biologicky aktivní nízkomolekulární látky odvozené od molekuly cholesterolu. Tyto látky hrají zásadní roli v řadě fyziologických procesů v lidském těle jako jsou regulace metabolismu, růstu a reprodukce. Steroidní hormony se staly důležitým biologickým indikátorem pro diagnostiku mnoha závažných endokrinních onemocnění souvisejících s funkcí nadledvin nebo pohlavních žláz. Stanovení hladin steroidních látek je používáno nejen v klinické praxi, nýbrž i při vědeckých studiích či antidopinkových kontrolách. Z tohoto důvodu je důležité vyvinout spolehlivou, citlivou a specifickou analytickou metodu pro přesnou kvantifikaci steroidních látek a jejich metabolitů v těle. Chromatografické techniky s hmotnostní detekcí splňují tyto požadavky a v současnosti jsou jedny z nejpoužívanějších metod pro tuto analýzu. Práce je zaměřena na optimalizaci zpracování složité biologické matrice a následnou kvantifikaci vybraných endogenních steroidů metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní detekcí (HPLC-MS). Vyvinutá metodika bude použita pro analýzu vzorků lidských sér v rámci klinické studie užití rostliny Tribulus terrestris u zdravých dobrovolníků a její možný vliv na zvýšení hladin steroidních hormonů v krvi.
|
11:00
|
Bc.
Natalie
Kolderová
|
M1
|
Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Enantioseparace syntetických katinonů superkritickou fluidní chromatografií s hmotnostní detekcí
|
detail
Enantioseparace syntetických katinonů superkritickou fluidní chromatografií s hmotnostní detekcí
Syntetické katinony jsou strukturně odvozeny od přírodního (S)-katinonu, látky obsažené v katě jedlé (Catha edulis), jež je známa pro své psychostimulační účinky. V posledních letech se velice rychle vyvíjí syntéza těchto nových derivátů, které tvoří významnou skupinu nových psychoaktivních substancí (NPS). NPS na bázi katinonu lze snadno získat na internetu. Mnohé z těchto látek jsou prozatím legislativně nepostižitelné, neboť se jejich struktura odlišuje od aktuálně známých zakázaných drog a jsou tudíž široce zneužívány jako rekreační drogy. Tyto syntetické deriváty obsahují ve své struktuře centrum chirality a vyskytují se zpravidla v racemické formě. Vzhledem k rychlému rozvoji syntetických katinonů je známo velice málo informací o jejich toxikologii a farmakologii, o rozdílech v účinku jednotlivých enantiomerů pak není známo prakticky nic.
Naším cílem je vyvinout metodu enantioseparace strukturně modifikovaných syntetických katinonů a jejich metabolitů za pomoci superkritické fluidní chromatografie (SFC) s využitím zwitteriontových chirálních stacionárních fází. V rámci této práce jsou optimalizovány podmínky separace v SFC za použití hmotnostní detekce. V budoucnu budou zwitteriontové kolony využity k určení poměru enantiomerů studovaných látek v biologických vzorcích.
|
11:00
|
Barbora
Mužíková
|
B3
|
Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Identifikace nových psychoaktivních látek metodou NMR
|
detail
Identifikace nových psychoaktivních látek metodou NMR
Nové psychoaktivní substance jsou látky vykazující omamné či psychotropní účinky. Patří mezi nejinovativnější látky na evropském i světovém drogovém trhu; na konci roku 2016 Evropské monitorovací centrum pro drogy a drogovou závislost (EMCDDA) sledovalo již 620 nových psychoaktivních látek. Nejvíce zachycených nových drog patří do skupiny syntetických kanabinoidů a syntetických kathinonů, následují fenethylaminy, opioidy, benzodiazepiny a další. Ne všechny tyto nové drogy jsou regulované českou nebo evropskou legislativou, proto je jejich vývoj i užívání na vzestupu. Cílem práce je identifikovat látky patřící do této skupiny pomocí strukturní analýzy nukleární magnetickou resonancí, vytvořit knihovnu NMR spekter a následně vyvinout metodu pro jejich kvantifikaci, a to jak v čisté formě, tak i ve směsích.
|