|
---
|
Bc.
Kateřina
Obytová
|
M2
|
doc. Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Stanovení CBD a jeho metabolitů v potkaním séru metodou HPLC-MS
|
detail
Stanovení CBD a jeho metabolitů v potkaním séru metodou HPLC-MS
Kanabidiol (CBD) je jedním z hlavních zástupců fytokanabinoidů, což jsou farmakologicky aktivní sloučeniny produkované rostlinami rodu konopí. Jedná se o látku se širokým léčebným potenciálem, ve smyslu rozsáhlých neuroprotektivních účinků, redukce zánětu či mírnění neuropatické bolesti. Poslední dobou pozorujeme vzrůstající trend v užívání konopných produktů a s ním spojený rychlý rozvoj trhu s rozmanitými výrobky, které obsahují široké spektrum fytokanabinoidů, v němž ale převládá CBD. S popularitou konopných produktů roste i potřeba nových analytických metod pro spolehlivou analýzu fytokanabinoidů a jejich metabolitů v různorodých matricích. Pro analýzu fytokanabinoidů v biologických matricích je kvůli jejich velmi nízké koncentraci vyžadována značně citlivá a spolehlivá analytická metoda. Cílem této práce je vyvinout a validovat metodu kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií (HPLC-MS) vhodnou pro kvalitativní a kvantitativní analýzu CBD a jeho hlavních metabolitů (7-OH-CBD a 7-COOH-CBD) v potkaním séru. Tato metoda bude použita pro analýzu reálných vzorků séra, které byly získány v rámci experimentu transdermálního přenosu CBD, kdy byly laboratorním zvířatům aplikovány přípravky obsahující tento fytokanabinoid.
|
|
---
|
Bc.
Kristýna
Fedorová
|
M2
|
doc. Ing. Martin Kuchař, Ph.D.
|
Chirální separace inherentně chirálních makrocyklických receptorů
|
detail
Chirální separace inherentně chirálních makrocyklických receptorů
Chirální analýza dnes hraje významnou úlohu v mnoha odvětvích, a to nejen co se týká forenzních aplikací, ale je důležitá i při vývoji agrochemikálií a výzkumu potravinářských aditiv. Pro tyto účely je možné využít inherentně chirální makrocyklické receptory, kalixareny. Ve forenzní analýze byly kalixareny již využity například jako receptory pro chirální rozpoznání nových psychoaktivních látek. Samotná enantiomerní čistota výchozích látek je ovšem zásadní při vývoji těchto nových receptorů a pro její zajištění je důležitý vývoj nových metod chirální separace.
Jelikož jsou enantioseparační metody zaměřené na tento typ látek omezené a využívají hlavně metod kapalinové chromatografie, je tato práce věnována vývoji metody za využití relativně nové techniky, superkritické fluidní chromatografie (SFC), jež přináší řadu výhod ve srovnání s ostatními separačními technikami. Chirální stacionární fáze (CSP) použité pro tuto práci jsou na bázi polysacharidů. Jelikož potenciál těchto kolon k enantioseparaci obecně nelze předem určit, byly vybrány 4 různé CSP. Bude studováno složení mobilní fáze, a to konkrétně vliv modifikátorů, kyselých a bazických aditiv, na separaci enantiomerů kalixarenů. Dále bude zjišťován vliv chromatografických parametrů, jako je teplota kolony, průtok a tlak.
|
|
---
|
Pavlína
Soukupová
|
B3
|
PharmDr. Petra Cihlářová, Ph.D.
|
Stanovení ostarinu v doplňcích stravy metodou HPLC-MS
|
detail
Stanovení ostarinu v doplňcích stravy metodou HPLC-MS
Ostarin patří do skupiny selektivních modulátorů androgenních receptorů (SARM). Používá se pro svůj pozitivní vliv na růst svalové a kostní hmoty. Pro své schopnosti selektivní vazby na androgenní receptory kosterního svalstva (na rozdíl od steroidů, které se váží na veškeré androgenní receptory v těle) je zneužíván zejména kulturisty pro rychlý nárůst svalové hmoty a vidinu absence vedlejších účinků, které byly spojeny s anabolickými steroidy. Od roku 2008 je ostarin a další látky ze skupiny SARMs zařazen na seznam WADA a jeho užití ve sportu je považováno za doping. Cílem práce je optimalizovat a validovat metodu stanovení ostarinu v doplňcích stravy. Studován je vliv několika rozpouštědel na výtěžnost ostarinu z různých matric (laktóza, mikrokrystalická celulóza a další). Porovnávány jsou také matriční efekty. Pro stanovení ostrinu je použita metoda HPLC-MS/MS.
|
|
---
|
Adéla
Bohatá
|
B3
|
PharmDr. Petra Cihlářová, Ph.D.
|
Studium farmakokinetiky baeocystinu a norpsilocinu v tkáních metodou HPLC-MS
|
detail
Studium farmakokinetiky baeocystinu a norpsilocinu v tkáních metodou HPLC-MS
Baeocystin patří do skupiny tryptaminových alkaloidů, jedná se o derivát psilocybinu. Vyskytuje se v různých druzích hub, nejznámější je rod Psilocybe. Tyto houby jsou zdrojem psychoaktivních látek patřících mezi halucinogeny. Pro správné pochopení účinků těchto látek je vhodné získat co nejvíce informací o jejich chování v organismu.
Práce se týká studia farmakokinetiky baeocystinu a jeho metabolitu norpsilocinu v potkaních tkáních, konkrétně v játrech, plicích a mozku. Pro vývoj metody jsou použity vepřové tkáně. Zkoušeny jsou různé postupy zpracování tak, aby bylo dosaženo výtěžnosti dostatečné pro stanovení v reálných vzorcích. Metoda bude následně použita pro stanovení baeocystinu a norpsilocinu v potkaních tkáních.
|
|
---
|
Bc.
Lukáš
Mazur
|
M2
|
-
|
Vliv epigenetických změn na vybrané fytohormony a transkripty zahrnuté v imunitní reakci rostlin
|
detail
Vliv epigenetických změn na vybrané fytohormony a transkripty zahrnuté v imunitní reakci rostlin
Rostliny jsou každodenně nuceny čelit množství stresu, se kterým se během evoluce musely naučit vypořádávat a vyvinout si specifické obranné mechanismy. Důležitými faktory, které mohou hrát roli v obranných drahách, jsou i epigenetické mechanismy, jako je metylace DNA nebo histonové modifikace.
V této práci se zabýváme vlivem epigenetických mechanismů, kyseliny beta-aminomáselné (BABA) a jejich vzájemného působení na transkripty genů SOBIR1, WRKY33, RBOHD, JAZ1, SARD1 a SGT1B účastnících se obranných drah u linií A. thaliana Col-0, ddm1 a ibm1. Z porovnání hladin transkriptů vybraných genů u linií Col-0, ddm1 a ibm1, bylo zjištěno, že u linie ddm1 došlo k největšímu snížení regulace exprese, zatímco u linie ibm1 byla snížená regulace pouze u dvou genů a zbytek zůstal beze změny. Dále byla stanovována změna hladin transkriptů vybraných genů po přidání 0,5mM BABA k jednotlivým liniím. Změna hladin transkriptů byla pozorována pouze u mutantních linií ddm1 a ibm1, kde však u většiny genů rovněž nedošlo k významné změně. Výjimku tvořil gen JAZ1 u linie ddm1 vykazující zvýšenou regulaci a geny SOBIR1 a RBOHD u linie ibm1 vykazující naopak sníženou regulaci
|
|
---
|
Bc.
Kateřina
Knížková
|
M2
|
PharmDr. Petra Cihlářová, Ph.D.
|
Stanovení bioaktivních látek maralího kořene (Rhaponticum carthamoides)
|
detail
Stanovení bioaktivních látek maralího kořene (Rhaponticum carthamoides)
Maralí kořen (Rhaponticum carthamoides) je rostlina hojně využívaná v tradiční medicíně. Obsahuje biologicky aktivní látky, které mají příznivý účinek na lidský organismus. Cílem práce je vybrat některé z těchto látek, optimalizovat jejich extrakci a pomocí metody HPLC-MS/MS je analyzovat jak v rostlině samotné, tak v produktech dostupných na trhu.
V první části jsem se zaměřila na stanovení steroidních látek. Optimalizovala jsem extrakci 20-hydroxyekdysonu a polypodinu B. Vyzkoušela jsem různá extrakční činidla (50–70% methanol a ethanol) a časové intervaly (30, 60, 120 minut). Jako nejefektivnější jsem vybrala extrakci 60% ethanolem po dobu 60 minut. V zakoupených produktech se obsah 20-hydroxyekdysonu pohyboval řádově v rozmezí od 0,1 do 1000 µg a obsah polypodinu B od 0,01 do 100 µg na 1 g produktu. Další steroidní látky, konkrétně stigmasterol a ß-sitosterol, se špatně ionizují, a proto je pro jejich stanovení pomocí MS nezbytná derivatizace. Vyzkoušela jsem 3 derivatizační činidla, a to dansylchlorid, kyselinu pyridin-2-karboxylovou a 2-fluor-1-methylpyridinium-p-toluensulfonát (FMP). Jako nejvhodnější činidlo se jeví FMP. V dalším kroku jsem se zaměřila na optimalizaci extrakce a derivatizaci analytů takto získaných.
|
